Autoroute 401 (Ontario)

Plusieurs sections séparent les villes de contrôle de l'autoroute 401. Les villes de contrôles sont Windsor, London, Toronto, Kingston, Cornwall (ainsi que Montréal vers le Québec).

L'extrémité sud-ouest de l'autoroute 401 est situé dans les limites de la ville de Windsor. En date de 2024, les voies de la 401 se terminent sur la route 3 de l'Ontario aussi nommée la route Huron Church (Huron Church Road). La fin des voies correspond au kilomètre 4,31 de la 401, car 4,31 kilomètres séparent la 401 du pont vers Détroit (frontière des États-Unis au milieu de la rivière Détroit), le pont Gordie Howe. Actuellement, la Huron Church Road (3 ouest) est le seul lien avec la traversée actuelle vers Détroit, le pont Ambassadeur, vers les Interstates 75 (Détroit centre / Toledo, OH), 94 (banlieues ouest et est / Chicago, IL), et 96 (banlieues Nord / Lansing, MI). Plusieurs destinations américaines importantes sont accessibles depuis le pont Ambassadeur.
Plus de sept feux de circulation doivent être franchis dans Windsor avant d'atteindre le pont Ambassadeur, sur une distance de quatre kilomètres.
Le terminus sud-ouest actuel est la sortie 5 de la 401 (direction Ouest), juste au Sud de la E. C. Row Expressway. Avant juin 2015, ce terminus était situé sept kilomètres à l'est (km 12).

Les sept premiers kilomètres de la 401 (km 5–12) ont été ouverts en juin 2015, et cette section est nommée la Herb Gray Parkway. Elle suit de très près la route 3 (Huron Church Road, ancienne voie principale), majoritairement à l'ouest de celle-ci, mais ne la remplace cependant pas; en effet, la 3 a été à quelques endroits reconstruites pour enjamber la 401, des deux côtés de l'autoroute.
Cette section de la 401 est essentiellement située sous terre, avec trois courts tunnels aménagés pour passer sous les rues de Windsor et du secteur LaSalle. Deux échangeurs sont aménagés (sorties 7 et 10) dans cette section. Elle se dirige vers le sud-est sur les trois premiers kilomètres (5–8), puis courbe légèrement vers l'est-sud-est jusqu'au kilomètre 12, soit en suivant exactement le tracé de la Huron Church Road.
À la frontière des villes de LaSalle et Tecumseh, la 401 courbe à 60° pour se diriger vers le nord-est, en possédant un vaste échangeur avec la 3, vers Essex et Leamington (au km 12). Ce point à d'ailleurs longtemps été le terminus ouest de la MacDonald-Cartier Freeway, entre 1957^[6] et 2015. Peu après la sortie 12, la 401 prend son tracé originel en se dirigeant vers le à nord-est sur deux kilomètres, servant de frontière entre LaSalle et Tecumseh. Aux kilomètres 13 et 14, deux échangeurs sont présents, la sortie 13 étant signalisée pour Windsor centre-ville et le tunnel vers les États-Unis (tunnel Windsor-Détroit reliant les deux centres-villes). À la hauteur de la sortie 14 (vers l'aéroport et Division Road), la MacDonald-Cartier Freeway tourne vers l'est, direction qu'elle gardera pour les 35 prochains kilomètres. Le territoire devient essentiellement agricole plus on s'éloigne vers l'est à partir de la sortie 14. Au kilomètre 21, elle traverse la route de comté 19, et par le fait même la limite entre les municipalités de Tecumseh et Lakeshore.

La 401 devient alors le principal lien vers le reste de l'Ontario à partir de l'agglomération de Détroit–Windsor. Elle demeure la seule autoroute dans l'extrême sud-ouest ontarien ainsi que la principale voie rapide vers London, la deuxième ville de contrôle.
Entre les kilomètres 21 et 50, l'autoroute 401 traverse un territoire uniquement agricole et extrêmement plat, l'une des régions les plus fertiles du Canada, dans cette grande pointe entre le lac Saint-Clair (extrême sud du lac Huron) et l'ouest du lac Érié. Elle possède environ une sortie à chaque sept kilomètres jusqu'au kilomètre 63. Elle passe au sud de la municipalité de Belle River, au nord de Comber, et tout juste au nord de la ville de Tilbury, au kilomètre 60. Avant Tilbury, elle croise la route 77 sud vers Leamington, Staples, et la pointe-Pelée, le point le plus au sud du Canada ^[4].
Tilbury est le seul village à se situer directement à côté de l'autoroute entre Windsor et London. Un centre de services est présent après la sortie 63, des deux côtés.
Elle adopte par la suite une orientation davantage nord-est jusqu'aux approches de London. De nombreuses éoliennes sont visibles depuis l'autoroute 401 dans l'extrême sud-ouest ontarien, le territoire très plat favorisant les grand vents.
La 401 rejoint la ville de Chatham-Kent entre les kilomètres 81 et 90, soit les deux échangeurs menant vers la ville. La grande route passe quelques kilomètres au sud de la ville, ne croisant que la route 40 comme route provinciale. La distance entre les échangeurs est ensuite beaucoup plus grande, variant entre huit et douze kilomètres jusqu'au kilomètre 157. Au kilomètre 109, elle possède un échangeur permettant l'accès à Ridgetown et Dramesville. Highgate est une municipalité située au sud de la 401 à la hauteur de la sortie 117. Rodney et West Lorne bordent l'autoroute quelques kilomètres au sud à la hauteur des échangeurs 129 et 137. Un centre de service est présent au kilomètre 147, dans les deux directions.
Sur ses 160 premiers kilomètres, la 401 traverse le centre de la péninsule de l'extrême sud-ouest ontarien en étant parallèle à la côte du lac Érié. En effet, elle suit les rives environ 15 à 20 kilomètres à l'intérieur des terres. Au kilomètre 160, elle entre beaucoup plus dans les terres pour rejoindre London.
L'autoroute 401 continue de se diriger vers le nord-est sur 17 kilomètres en traversant une région uniquement agricole. Au kilomètre 177, alors qu'elle croise la route 4 de l'Ontario (vers St. Thomas et l'autoroute 402 ouest), elle entre dans la région métropolitaine de London ^[4].

Arrivant au sud-ouest de la ville de London, l'autoroute Macdonald-Cartier commence par traverser une région agricole prédominante jusqu'au kilomètre 183, où elle croise l'autoroute 402 dans un échangeur partiel. L'autoroute 402 est seulement accessible depuis la 401 ouest. L'autoroute 402 ouest est une autre possibilité pour aller aux États-Unis, alors qu'elle connecte 100 kilomètres à l'ouest à la ville de Sarnia ainsi qu'au pont Bluewater, vers Port Huron au Michigan ainsi que les interstates 69 et 94.
La 401 s'élargir ensuite à une autoroute à six voies pour traverser le sud de la ville de London. Elle possède trois échangeurs vers le centre-ville, soit les sorties 186 (Wellington Road), 189 (Highbury Avenue) et 194 (Veterans Memorial Parkway). Après Windsor, London est la deuxième ville de contrôle de la 401.
Elle adopte une orientation vers le nord-est entre les kilomètres 183 et 187, puis vers l'est jusqu'à ce qu'elle quitte l'agglomération de London. L'autoroute 401 demeure la principale autoroute connectrice du grand London.

Le débit du trafic devient plus grand dans cette section, en raison notamment de l'approche de la grande région de Toronto, mais aussi à cause de la venue du trafic à la fois des autoroutes 401 et 402 vers l'est.
Pour les 13 kilomètres à l'est de London, l'autoroute 401 se dirige vers l'est-nord-est, traversant entre autres le quartier industriel à l'est de London (aux alentours du kilomètre 195) et par la suite des champs principalement. Au kilomètre 210, elle tourne directement vers le nord-est pour une distance de 25 kilomètres. Elle croise la route 19 au kilomètre 218, passe à proximité des villages de Ingersoll (au nord) et de Salford (au sud). Un centre de service, situé des deux côtés de l'autoroute, est présent près du kilomètre 224. L'autoroute 401 arrive ensuite dans la ville de Woodstock.
Elle traverse majoritairement la secteur sud de Woodstock, entre les kilomètres 235 et 237. Une jonction importante est également importante à la hauteur de Woodstock sur la 401; au kilomètre 236, elle croise l'autoroute 403 (direction Est seulement), vers Brantford, Hamilton, ainsi que la portion sud du Golden Horseshoe incluant la région de Niagara. D'ouest en est, la 403 est la deuxième autoroute ontarienne que croise la 401.
Après l'échangeur partiel avec la 403, l'autoroute MacDonald Cartier tourne vers le nord-est pour 18 kilomètres, en quittant la ville de Woodstock par cette direction. Un dernier échangeur permet l'accès au secteur Nord de la ville, au kilomètre 238, qui permet l'accès avec la route 2. Elle passe à proximité de Drumbo au kilomètre 250, en continuant de traverser une région à relief très plat et agricole. Au kilomètre 268, elle entre dans le secteur peuplé de Kitchener-Waterloo-Cambridge.
Elle possède quelques courbes entre les kilomètres 272 et 275, alors qu'elle devient la frontière entre Kitchener et Cambridge au kilomètre 273. Au kilomètre 275, la 401 possède un échangeur avec le Homer Watson Boulevard, puis trois kilomètres au nord-est, la route 8 croise la 401 dans un échangeur plus imposant. La route 8 connecte la 401 au nord-ouest en étant une autoroute, vers le cœur du secteur Kitchener-Waterloo. Au sud-est, la 8 se dirige vers le centre-ville de Cambridge sous le nom de Coronation Boulevard. L'autoroute 401 tourne ensuite vers l'est pour passer au nord du centre de Cambridge, tout en possédant trois échangeurs vers la ville (sorties 282, 284 et 286). Entre les kilomètres 295 et 299, elle forme un multiplex avec la route 6, qui se dirige vers Guelph et Hamilton.
L'achalandage de la 401 devient beaucoup plus important, car l'agglomération de Toronto est à seulement 30 kilomètres à l'est. Elle devient également une autoroute à six voies. Entre les kilomètres 299 et 320, elle se dirige vers l'est-nord-est pour rejoindre la ville de Milton, en traversant plus boisée et vallonnée que depuis le début de sa route dans le sud-ouest de l'Ontario. Milton est d'ailleurs l'entrée dans le GTA (Greater Toronto Area, pour grande aire urbaine de Toronto), aux alentours du kilomètre 320.

L'autoroute 401 devient alors la principale autoroute connectrice ouest-est de la grande région de Toronto. Sur une distance de 90 kilomètres (du kilomètre 330 au kilomètre 420), elle se situe dans des zones urbanisées (à l'exception d'une section à l'est d'Ajax). C'est la section la plus achalandée de l'autoroute, mais également la plus empruntée d'Amérique du Nord. Elle possède un minimum de six voies (3-3) dans cette section, et atteint plus de dix-huit voies de largeur aux alentours de l'aéroport international Pearson de Toronto.
Sur une distance d'environ 55 kilomètres (du kilomètre 344 au kilomètre 399), les voies de la 401 sont réparties sur quatre chaussées distinctes, soit deux pour chaque direction. Les voies externes (les plus à droite) sont appelées « voies collectrices (collector) » et les voies centrales sont appelées « voies express ». Des panneaux de signalisation de différentes couleurs sont employés afin de mieux différencier les chaussées. Les panneaux bleus sont réservés aux voies externes (voies collectrices), tandis que les voies centrales sont signalisées avec des panneaux normaux de couleur verte. Entre les kilomètres 344 et 399, toutes les sorties sont accessibles à partir des voies collectrices, tandis que seulement quelques sorties majeures sont reliées directement aux voies express. Un total de sept autoroutes ontariennes croisent l'autoroute 401 dans cette section.
Sur une distance de 90 kilomètres, la 401 possède 45 échangeurs dans le grand Toronto, ce qui fait de la 401 l'autoroute possédant le plus d'échangeurs au Canada, sur une telle distance.
Plusieurs quartiers industriels sont également traversés sur cette section, augmentant ainsi l'importance de l'autoroute 401 aux points de vue commercial, économique et d'achalandage.
Le premier vaste échangeur de la 401 dans le grand Toronto est situé au nord-est de Milton, au kilomètre 330, avec l'autoroute 407 (aussi appelée ETR pour Express Toll Road), une autoroute à péage qui contourne la région la plus urbanisée par le nord-ouest. La 401 se dirige par la suite vers l'est-nord-est sur une distance de 18 kilomètres. Elle commence par traverser Meadowvale Village, et continue dans le secteur industriel de Mississauga, ville que la 401 ne traverse pas directement dans le centre mais frôle tout de même.

Entre les kilomètres 340 et 344, trois échangeurs relient la 401 au quartier industriel de Mississauga. Un deuxième échangeur important est situé au kilomètre 344, avec les autoroutes 403 (au sud) et 410 (au nord), vers le centre de Mississauga, Hamilton et Brampton. Entre la 407 et la 403/410, la Macdonald–Cartier Freeway est presque parallèle à l'autoroute 407, située quelques kilomètres plus au nord.
Le système de voies collectrices/express commence après l'échangeur avec les autoroutes 403 et 410, puis la sortie 346 relie la 401 à Dixie Road. Jusqu'au kilomètre 349, l'autoroute 401 passe juste au sud du territoire de l'aéroport international Pearson de Toronto, en étant parallèle à la piste 06R-24L, située juste au Nord. Entre les kilomètres 350 et 352, un échangeur très complexe relie la 401 à l'autoroute 427, la Renforth Drive, l'Eglinton Avenue, ainsi qu'à la route 27 de l'Ontario. Cet échangeur permet l'accès, entre autres, à l'aéroport Pearson (427 nord), à Etobicoke (427 sud), ainsi qu'au centre-ville de Toronto en provenance de la 401 est (427 sud, Gardiner Expressway est). À partir de cet échangeur, la 401 est située dans le secteur le plus peuplé de la région du nord et nord-est de Toronto, et ce, pour 50 kilomètres.

Après l'échangeur 401/427, la 401 tourne vers le nord-est pour croiser la Dixon Road, et passer près du secteur industriel de l'aéroport, situé à l'ouest. Elle rejoint l'autoroute 409, cinq kilomètres au nord-est de la 427, dans un échangeur partiel seulement accessible depuis la 401 ouest. La 409 est le principal chemin vers l'aéroport Pearson depuis la 401 ouest.
L'autoroute 401 traverse par la suite la Humber River, puis tourne vers l'est-nord-est pour entrer dans les quartiers de Weston et Downsview, au kilomètre 358. Après un échangeur avec la Weston Road, un autre échangeur complexe et important permet la connexion avec l'autoroute 400, vers les banlieues Nord de Toronto, Barrie, Huntsville, North Bay (via la route 11), et Sudbury (via la route 69). Au sud, la 400 rejoint Black Creek Road, vers le centre de York et ultimement de Toronto.
La section la plus achalandée de l'autoroute 401 est située à l'est de la 400, passant directement dans les quartiers de Downsview, York, North York et Willowdale. C'est l'une des sections très urbanisée de la ville de Toronto. La 401 demeure la principale autoroute du secteur, avec, plus au Nord, la 407, qui traverse une section un peu moins urbanisée.
Après avoir eu des échangeurs avec Keele Street et Dufferin Street au kilomètres 362 et 364 respectivement, elle croise la Allen Road au kilomètre 365, qui possède les standards autoroutiers. Cette autoroute devait se poursuivre vers le centre de Toronto sous le nom de Spadina Expressway, mais n'a jamais été mise en service. Pour les dix prochains kilomètres, soit entre les kilomètres 365 et 375, la 401 possède des échangeurs avec Bathurst Street, Avenue Road, Yonge Street, Bayview Avenue et Leslie Street, respectivement au kilomètres 366, 367, 369, 371 et 373. La 401 possède entre douze et seize voies dans cette section. Elle traverse également deux petites rivières, soit la West et East Don River. Au kilomètre 375, la Don Valley Parkway (au sud) ainsi que l'autoroute 404 croisent la 401 dans un échangeur multi-niveau, permettant l'accès à Richmond Hill et Newmarket (404 nord), ainsi qu'au centre-ville de Toronto (DVP sud), soit le principal accès au centre-ville depuis la 401 ouest.

Devenant maintenant le principal lien Toronto–banlieues Est–Montréal, elle continue de se diriger vers l'est en traversant un secteur hautement urbanisé de Scarborough, et de Agincourt, en croisant Victoria Park Avenue, Warden Avenue, Kennedy Road, Brimley Road, McCowan Road, Markham Road, Neilson Road, Morningside Avenue et Meadowvale Road. Elle passe également à proximité du zoo de Toronto. Après son échangeur avec Meadowvale Road, elle tourne vers le sud-est pour s'approcher suffisamment des rives du Lac Ontario pour croiser Lakeshore Road au kilomètre 392, vers Scarborough. Après un tournant à 45° vers le nord-est, l'autoroute 401 traverse maintenant les banlieues Est de Toronto, soit Pickering et Ajax. 5 échangeurs sur une distance de 12 kilomètres permettent l'accès à Pickering et Ajax. À la sortie 399 (Brock Road), c'est la fin (en direction Est) et le début (en direction Ouest) du système de voies collectrices/distributrices, mais il est prévu d'étendre cette configuration vers l'est. Entre les kilomètres 404 et 408, la 401 traverse un territoire moins urbanisé. En date de 2024, l'autoroute 412 est en construction pour atteindre la 407 plus au nord, et devrait croiser la 401 aux alentours du kilomètre 408, à l'ouest de Whitby. Cette autoroute améliorera le lien de contournement de Toronto (par le nord), ainsi qu'avec son autoroute jumelle, la 418, située plus à l'est, qui est également en construction. Jusqu'au kilomètre 419, l'autoroute 401 traverse à nouveau un territoire urbanisé, celui des villes de Oshawa–Whitby, l'autoroute 401 qui a plus de six échangeurs vers ces villes. Aux alentours du kilomètre 420, après avoir traversé le centre d'Oshawa, elle tourne vers le sud-est et quitte la région la plus urbanisée du grand Toronto ^[4],[7].

L'autoroute 401 quitte la grande région de Toronto (GTA) par l'est-nord-est, en suivant les rives du lac Ontario, entre un et cinq kilomètres jusqu'au kilomètre 485. Tout juste après Oshawa, au kilomètre 425, elle passe au sud de Bowmanville, puis traverse la région de Clarington. Elle traverse un secteur tout de même industriel sur les rives du lac. Au kilomètre 435, un échangeur en trompette est présent avec les routes 35 et 115, un segment autoroutier qui relie la région à la ville de Peterborough. Après cet échangeur, l'achalandage de la 401 diminue, mais demeure tout de même très élevé avec ses six voies disponibles (trois dans chaque direction).
Toujours en se dirigeant vers l'est-nord-est, l'autoroute des Héros atteint Newtonville, une petite municipalité agricole, au kilomètre 448. Port Hope et Cobourg sont les prochaines villes traversées par la 401 entre les kilomètres 460 et 475. Elle passe au nord de ces deux villes, en demeurant environ trois kilomètres dans les terres. Après Cobourg, elle s'éloigne légèrement de la côte puis traverse le territoire plus valloneux et forestier du comté de Northumberland. Le nombre de voies baisse également à quatre voies (2-2), et ce, jusqu'à Kingston.
Au kilomètre 510, la grande route passe à Brighton. 15 kilomètres plus à l'est, elle traverse la Treat River, puis possède trois échangeurs menant vers Trenton, situés au nord de la ville. À ce point, c'est également la fin de l'appellation officielle de l'autoroute des Héros.
La région redevient agricole à l'est de Trenton, puis l'autoroute 401 possède trois échangeurs vers Belleville, la principale ville entre Oshawa et Kingston. Elle croise les routes 62 et 37 au nord de Belleville, reliant vers Madoc, Tweed et le parc des Sandbanks. Jusqu'à Kingston, la 401 est beaucoup plus loin du lac Ontario, le comté de Prince Edward formant une pointe allongée dans le lac.
Par la suite, elle traverse une région plus agricole tout en possédant moins de courbe jusqu'à Kingston, 70 kilomètres à l'est de Belleville. Elle passe près des municipalités de Marysville, Napanee et Odessa, aux kilomètres 565, 580 et 600 respectivement. Au kilomètre 611, elle tourne vers l'est-sud-est pour s'approcher du centre de Kingston, alors qu'elle s'élargit à six voies. Un total de cinq échangeurs relient la 401 à Kingston et au secteur de Cataraqui, soit les sorties 611, 613, 615, 617 et 619. Après le kilomètre 620, elle traverse le canal Rideau, qui se jette dans le lac Ontario juste au sud ^[4].

Le débit de trafic devient moins important à l'est de Kingston, mais demeure une autoroute tres achalandée car elle demeure le principal lien Toronto-Ottawa et Toronto-Montréal. À l'est de Kingston, la 401 croise la route 15 au kilomètre 623, puis adopte une trajectoire vers l'est-nord-est. Le territoire est un peu plus valloneux jusqu'à Brockville. Au kilomètre 645, deux échangeurs relient la 401 à Gananoque, la porte d'entrée de la région des Mille-Îles. La promenade des Mille-Îles, l'ancien tracé de l'autoroute avant son élargissement, croise la 401 au kilomètre 647. La 401 possède alors plus de courbes en entrant dans la région plus forestière, passant près de Ivy Lea au kilomètre 660.

À Leeds and the Thousand Islands, au kilomètre 661, un important échangeur trumpet est présent avec la route 137, qui se dirige vers le sud pour traverser le fleuve Saint-Laurent sur deux ponts à treillis, reliant la 401 aux États-Unis et à l'Interstate 81. L'I-81 traverse le nord-ouest de l'État de New York, vers Watertown et Syracuse.
La 401 tourne alors vers le nord-est pour suivre de près le fleuve Saint-Laurent. Elle passe près de Mallorytown au kilomètre 675, puis 10 kilomètres plus loin, elle croise à nouveau le promenade des Mille-Îles, à son terminus est. 11 kilomètres au nord-est, elle passe dans Brockville, en possédant deux échangeurs, soit les sorties 696 et 698. Au kilomètre 700, elle redevient une autoroute plutôt agricole, passant près de Prescott au kilomètre 715. À Johnstown, au kilomètre 721, un échangeur autoroutier partiel relie la 401 à l'autoroute 416, qui se dirige vers le nord vers Ottawa, remplaçant la route 16. Un pont pour relier Johnstown à Ogdensburg est également présent. L'autoroute 401, depuis sa jonction avec la route vers l'Interstate 81, constitue le principal corridor ouest-est de la région, aucune Interstate américaine étant présente de l'autre côté de la frontière pour relier le nord de l'État de New York tout en étant parallèle à la 401.
Elle poursuit ensuite son tracé parallèle au fleuve Saint-Laurent en passant près des municipalités de Cardinal (km 730), Iroquois (km 738), Morrisburg (km 750), Upper Canada Village (km 758) et Long Sault (km 778). Cette section est beaucoup plus rurale. Au kilomètre 785, elle entre dans la région de Cornwall.
Un total de quatre échangeurs relient la 401 à Cornwall, soit ceux des sorties 786, 789 (route 138, Brookdale Avenue), 792 (McDonnell Avenue) et 796 (Boundary Road). L'autoroute 401 évite le secteur urbanisé de Cornwall, en passant au nord de cette ville de 47 000 habitants^[4].

Tout en demeurant parallèle au fleuve, elle continue son chemin vers le nord-est en s'approchant de la frontière du Québec. 3 échangeurs sont présents, soit les sorties 804 (vers Summertown), 814 (Lancaster) et 825. Au kilomètre 828,020, elle traverse la frontière entre l'Ontario et le Québec, au nord-est de Bainsville ^[4].

Au sud-ouest de la municipalité de Rivière-Beaudette, Québec, la 401 possède son terminus est à la frontière Ontario-Québec. Ce point est unique, puisqu'il est le plus haut point de kilométrage (828,020) sur une autoroute au Canada, et le deuxième en Amérique du Nord, après l'Interstate 10 au Texas, qui atteint le numéro 880 (distance en miles). Le numéro de sortie 825 est le plus haut numéro de sortie au Canada. Également, c'est le kilomètre 0 de l'autoroute 20, qui atteint la ville de Montréal 70 kilomètres plus à l'est. C'est à la fois la fin de la plus longue autoroute sous même juridiction au Canada et le début de la deuxième plus longue autoroute sous même juridiction au Canada (l'autoroute 20), d'une longueur de 627 kilomètres.

Les différentes sections de l'autoroute 401 ont été construites entre 1947 et 1968.

Autoroute ontarienne desservant le sud de l'Ontario, l’autoroute 401 est aussi connue sous le nom Macdonald-Cartier Freeway (en français « autoroute Macdonald-Cartier »).

La 401 forme avec l'autoroute 20 l'épine dorsale du réseau routier du corridor Québec-Windsor, où réside plus de la moitié de la population du Canada. La route est appelée par les ontariens The 401, prononcé four-oh-one (en français « quatre cent un »). Le 24 août 2007, on renomme la section entre Toronto et Trenton sous le nom Highway of Heroes (en français « autoroute des héros ») en l'honneur des soldats canadiens morts durant la guerre d'Afghanistan.

La première section de cette autoroute, originellement numérotée route 2A, reliait Highland Creek (Scarborough) à Oshawa. Les travaux débutèrent en 1938 pour contourner une section de la route 2 particulièrement congestionnée. La majorité des infrastructures ont été réalisées avant la Seconde Guerre mondiale, mais la construction fut interrompue durant ce conflit, ainsi l'autoroute fut mise en service uniquement en 1947. Durant cette pause, le gouvernement ontarien en a profité pour déterminer un meilleur emplacement pour la future autoroute.

L'autoroute reçut sa numérotation actuelle en 1952. Le dernier segment entre Gananoque et Brockville fut mis en service en 1968 pour contourner une section de route longeant le fleuve Saint-Laurent qui comprenait plusieurs intersections à niveau et entrées privées. Cette route est maintenant connue sous le nom de « Promenade des Mille-Îles ». La dernière intersection à niveau du corridor actuel fut convertie en échangeur en 1968, elle se situait à Joyceville à l'est de Kingston.

En 1965, le premier ministre ontarien John Robarts nomma l'autoroute 401 The Macdonald-Cartier Freeway en l'honneur de Sir John A. Macdonald et Sir George-Étienne Cartier, les deux plus importants pères de la confédération du Canada-Uni et ce, pour souligner le centenaire de la confédération canadienne en 1967. Cette appellation est utilisée sur les cartes et les documents officiels, mais très peu mentionnée dans les conversations ou sur les indications. En 1961, il avait été proposé de nommer l'autoroute « The Leslie M. Frost Thruway » en l'honneur de l'ancien premier ministre ontarien, cette proposition fut approuvée par le gouvernement ontarien, mais jamais appliquée.

L’autoroute 401 débute sur la route 3 à 4,3 kilomètres de la rivière Détroit dans la ville de Windsor (et pas encore à la frontière avec le Michigan, où la promenade Windsor-Essex restera en construction jusqu'en 2017) et se termine à la frontière avec le Québec 823 kilomètres plus à l'est. Il y a 18 aires de service tout au long de la route permettant aux usagers d'avoir accès à des services sans quitter l'autoroute. Une plaque commémorative fut érigée à Mallorytown Oasis, une section du dernier tronçon terminé en 1968, relatant que la 401 était la plus longue autoroute non payante sous la même juridiction en Amérique du Nord. Cette marque fut par la suite surpassée par une section de l'Interstate 10 au Texas. C'est d'ailleurs cette dernière qui possède toujours ce record.

L’Autoroute MacDonald-Cartier traverse et borde plusieurs villes importantes de l'Ontario : Windsor, Chatham-Kent, London, Ingersoll, Woodstock, Kitchener, Cambridge, Guelph, Milton, Mississauga, Toronto, Pickering, Ajax, Whitby, Oshawa, Cobourg, Trenton, Belleville, Kingston, Brockville, et Cornwall.

La 401 croise plusieurs autres autoroutes: l'autoroute 402, l'autoroute 403, la route 8, la route 6, l'autoroute 407, l'autoroute 410, l'autoroute 427, l'autoroute 409, l'autoroute 400, l'autoroute 404, l'autoroute 412, l'autoroute 418, la route 35, la route 115, l'autoroute 416 et finalement l'autoroute 20 du Québec à la frontière avec cette province.

Il n'y a pas encore de jonction directe avec une autoroute américaine, mais les Interstates 75 et 375 à Détroit, et l'Interstate 81 dans l'État de New York ont un point situé à proximité de la 401. L'I-81 devient la route 137, un petit tronçon qui traverse la portion ontarienne du pont des Mille-Îles qui croise la 401.

Le 24 août 2007, le Ministère des Transports de l'Ontario annonça qu'une section de la 401, entre la Don Valley Parkway à Toronto et la base aérienne de Trenton sera renommée l'Autoroute des Héros (en anglais : Highway of Heroes), en addition de son appellation actuelle. Cette section est fréquemment utilisée par les convois funéraires qui transportent les dépouilles des soldats canadiens morts en Afghanistan de la base aérienne de Trenton vers les bureaux du coroner à Toronto. Depuis 2002, alors que le premier soldat canadien tombé au combat était rapatrié d'Afghanistan, des foules se massent sur les viaducs pour montrer leurs respects alors que le convoi funéraire passe.

L’autoroute 401 est considérée par plusieurs comme l'autoroute la plus fréquentée d'Amérique du Nord, avec une moyenne au-dessus de 425 000 véhicules par jour (2004), et ce, entre Weston Road et l'autoroute 400 à Toronto. Ainsi, la 401 surpasse la Santa Monica Freeway, une section de l'Interstate 10 à Los Angeles. En raison de son usage par la circulation locale et le trafic de transit en Ontario, l'achalandage journalier peut dépasser à l'occasion les 500 000 véhicules par jour.^{[réf. souhaitée]}

L’autoroute Macdonald-Cartier est la plus importante route du Canada, car elle lie le sud de l'Ontario, le Québec et le Michigan en plus de relier la plupart des autres autoroutes majeures de la province. Elle est le principal lien routier avec la métropole québécoise, Montréal et avec le nord est des États-Unis. Elle est également le seul lien routier majeur entre Toronto et Windsor-Détroit. La frontière entre Windsor et Détroit est le poste frontalier international le plus achalandé du monde. La 401 ne se rend pas jusqu’à Détroit. Par contre, une expansion future pourrait prolonger la 401 jusqu’à la frontière américaine. Environ 40 % des échanges commerciaux entre le Canada et les États-Unis transite par cette autoroute, ce qui représente le tiers des échanges commerciaux du pays, et 4 % des échanges commerciaux des États-Unis. Malgré sa grande importance économique, la 401 ne fait pas partie de la route transcanadienne.

Au XXI^e siècle, la section de l’autoroute 401 traversant le grand Toronto possède entre six et dix-huit voies, et la section entre l'autoroute 403 et Brock Road à Pickering est l'une des plus longues routes, sinon la plus longue, à posséder dix voies ou plus (sauf la section entre Carlingview Drive et l'autoroute 427, qui possède huit voies).

La section qui traverse Toronto était originellement une route rurale qui était entièrement à l'extérieur des limites de la ville de Toronto, à l'époque elle était surnommée le Toronto Bypass. Cette nouvelle autoroute stimula le développement dans les secteurs limitrophes et, avec la croissance rapide des banlieues, la 401 est rapidement devenue une autoroute urbaine de desserte locale, en plus de sa vocation initiale de route de transit, ce qui entraina des embouteillages monstres. Cette problématique fut atténuée en s'inspirant du système implanté sur le Dan Ryan Expressway à Chicago, c'est-à-dire en construisant deux chaussées par directions, les voies expresses d'une part et les voies de services (collecteur) de l'autre part (www.google.ca). En 1967, la 401 fut élargie de quatre voies à douze voies ou plus entre Islington Avenue et Warden Avenue, dans la région métropolitaine de Toronto. Au début des années 1970, les voies de service furent prolongées jusqu’à Neilson Road à l'ouest, puis en 1997 jusqu’à Brock Road à l'est. Une autre solution avait été à l'époque envisagée, c'est-à-dire la construction d'une autoroute parallèle à la 401. Ce projet a été finalement lancé en 1987 et la nouvelle autoroute ouvrit en 1997. Cette autoroute, l'autoroute 407, est à péage.

La section avec au moins douze voies s'étend entre Islington Avenue et Brock Road. L'autoroute 409 qui se sépare de la 401 tout juste à l'ouest de Islington Avenue et qui se rend à l'Aéroport international Pearson de Toronto a été construite pour détourner une partie du trafic de la 401. Cette solution n'a pas permis de régler le problème, ainsi, les dix voies de la 401 entre Islington Avenue et l'autoroute 427 ne suffisent pas à la demande, cette section de la route est particulièrement congestionnée. L'échangeur 401-427 est l'un des pires de la région de Toronto, car seulement huit voies (quatre par direction) permettent de traverser l'échangeur sur la 401 alors qu'il faudrait cinq ou six voies par direction. Pour ce faire, l'échangeur devrait être reconfiguré en entier. La 4^e voie a été ajoutée en 2005.

La 401 a des voies de service distinctes de la chaussée principale à Mississauga entre la jonction avec les autoroutes 403 et 410 et la jonction avec l'autoroute 427. Ces infrastructures ont été complétées en 1986, au même moment que la transformation de l'échangeur 401/403. Cette section possède dix-huit voies, ce qui en fait la section la plus large de l'autoroute 401. Par contre, uniquement dix voies font partie officiellement de la 401. Les voies de service de cette section sont des voies de connexion entre les autoroutes 403/410 et 427. L'échangeur avec les autoroutes 403/410 est un autre point critique de la route, car la 401 se rétrécit à huit puis à six voies à l'ouest de ce point. Il est prévu d'ajouter des voies de service à cette section, et ce, jusqu’à Mississauga Road.

Le Ministère des Transports de l'Ontario projette d'élargir l'autoroute à au moins six voies entre Windsor et la frontière avec le Québec. L'autoroute avait été initialement construite dans les années 1950 avec quatre voies et deux chaussées séparées, mais la bande médiane en gazon s'est depuis montrée inefficace à prévenir les changements de chaussée causant des collisions. En 1999, la section Windsor–London est surnommée Carnage Alley (que l'on peut traduire par « voie de carnage ») après une série d'accidents mortels, dont un carambolage de 87 véhicules qui fait sept victimes lors de la fête du Travail. Ainsi, la majorité des travaux d'améliorations vont inclure le remplacement de la bande de gazon médiane par un Ontario tall-wall (un mur de béton entre les chaussées) et l'ajout d'une voie par direction.

Les premières sections à bénéficier des améliorations sont les tronçons de Windsor/Tilbury, des régions de London et Kingston, de Port Hope/Cobourg et Cambridge/Woodstock. Ceux-ci seront suivies dans le futur des sections Trenton/Belleville et Cobourg/Kingston. Les autres parties de l'autoroute, London/Chatham/Tilbury et Kingston/frontière ne sont pas encore planifiées.

En 2005, des études ont été effectuées pour prolonger la 401 à l'ouest jusqu’à la frontière américaine. L'option privilégiée par le comité Canada-États-Unis est de prolonger la 401 dans un nouveau corridor routier, de construire un nouveau pont (ou tunnel) pour traverser la rivière Détroit et de relier le tout à l'Interstate 75. En 2011, l'Ontario a commencé à construire la promenade Windsor-Essex, une autoroute à six voies et plusieurs tunnels vers Brighton Beach à Windsor, terminés en juin 2015. Un nouveau pont (le pont Gordie Howe, en l'honneur d'un joueur de hockey canadien ayant longtemps joué à Détroit) reliera Windsor à Delray, un quartier de Détroit au nord de l’île Zug, pour ensuite rejoindre l'autoroute I-75. Le gouvernement fédéral financera la construction du pont, ce que sera repayé par les péages à la frontière.

Le MTO projette d'élargir la 401 à Mississauga, de six voies à douze voies entre l'échangeur 403/410 et Credit River, et à dix voies jusqu’à Mississauga Road.

Il y a plus de 150 échangeurs sur l'autoroute 401, ils sont numérotés d'ouest en est. Avec la reconstruction d'une partie de l'autoroute à Mississauga, plusieurs échangeurs devraient ajouter pour desservir cette région. Un autre projet de d'amélioration à Oshawa entraînera le remplacement de certains échangeurs par des plus récents. De plus, après le prolongement de l'autoroute 407 à l'est jusqu'aux routes 35/115, deux autoroutes devraient être construits pour relier la 401 à la 407. Celle-ci, appelées connecteur 401/407 Durham ouest et connecteur 401/407 Durham est, croiseront la 401 respectivement à Ajax et Clarington.

Le numéro de sortie le plus élevé de la 401 est 825, le deuxième plus élevé numéro de sortie en Amérique du Nord, après le numéro 880 de l'Interstate 10 au Texas. Par contre, si le Canada utilisait le système de mesures anglais, le numéro de la dernière sortie serait 513.

Autoroute 401 – Autoroute Macdonald-Cartier, Autoroute des Héros
Municipalité Ville	km dir. est[8]	km dir. ouest[8]	#	Intersection Destinations	Alt. (m)
Prolongement vers le pont Gordie Howe 5 kilomètres vers l'ouest, vers Détroit[9].
Windsor	4.307		–	Labelle Street, Huron Church Road – Windsor Centre, Détroit, Pont Ambassadeur	182
	–	4.707	5	R-3 ouest (Huron Church Road), Pont Ambassadeur Vers I-75, I-94 et I-96 – Détroit	181
	5.796	–	6	Cabana Road O., Todd Lane (route 6), LaSalle	181
	6.853	7.430	7	R-3 (Talbot Road), LaSalle	181
	10.094	10.800	10	Route 3, Leamington, Windsor Howard Avenue (route 9), Amherstburg	189
Windsor Tecumseh	–	13.020	13	Dougall Avenue, Vers Tunnel pour les É.-U. (Ancienne Route 3B/Autoroute 401A) (Direction ouest seulement)	192
Tecumseh	13.718	14.086	14	Route 46 du comté Essex (Ancienne Route 98), Essex, Windsor	192
Tecumseh Lakeshore	20.209	21.199	21	Route 19 du comté Essex, Manning Road, Tecumseh	187
Lakeshore	27.258	28.262	28	Route 25 du comté Essex, Puce Road, Puce	184
	33.981	34.386	34	Route 27 du comté Essex, Belle River Road, Woodslee, Belle River	183
	39.713	40.789	40	Route 31 du comté Essex (French Line Road), St. Joachim	183
	47.040	48.118	48	R-77 sud, Leamington Route 35 du comté Essex (Comber Road), Stoney Point	183
	55.539	56.282	56	Route 42 du comté Essex (Ancienne Route 2), Tilbury	179
Chatham-Kent	63.104	63.080	63	Route 2 de Chatham-Kent (Queen's Line, ancienne Route 2)	179
	81.190	81.233	81	Route 27 de Chatham-Kent (Bloomfield Road)	179
	89.604	89.835	90	R-40 nord, route 11 de Chatham-Kent (Communication Road), Blenheim, Chatham-Kent centre, Sarnia	183
	100.723	101.373	101	Route 15 de Chatham-Kent (Kent Bridge Road), Dresden, Ridgetown	189
	107.648	108.648	109	Route 21 de Chatham-Kent (Ancienne Route 21), Route 17 de Chatham-Kent (Victoria Road), Thamesville, Ridgetown	195
	115.986	116.917	117	Route 20 de Chatham-Kent (Orford Road)	212
West Elgin	128.894	129.852	129	Route 103 du comté Elgin (Furnival Road), Wardsville, Rodney	215
	137.520	137.415	137	Route 76 du comté Elgin (Graham Road, ancienne Route 76), West Lorne	216
Dutton/Dunwich	148.694	148.651	149	Route 8 du comté Elgin (Currie Road), Dutton	225
Dutton/Dunwich Southwold	157.050	157.936	157	Route 14 du comté Elgin (Iona Road), Melbourne, Iona	220
Southwold	163.680	164.616	164	Route 20 du comté Elgin (Union Road), Port Stanley, Shedden	227
London	176.284(A) 176,671(B)	176.583(A) 177.074(B)	177AB	R-4 (Colonel Talbot Road), St. Thomas, London	254
	~179		179	Wonderland Road sud	267
	–	183.823	183	A-402 ouest (Direction ouest seulement) – Sarnia, Port Huron (MI)	261
	186.477	186.509	186	Wellington Road sud, Exeter Road sud (Ancienne Route 135)	262
	188.724	189.703	189	Highbury Avenue (Ancienne Route 126), London Centre-Ville, St. Thomas	270
	193.085	194.027	194	Veterans Memorial Parkway (Ancienne Route 100), Aéroport de London (YXU)	275
Thames Centre	195.011	196.001	195	Route 74 du comté Middlesex (Westchester Bourne, ancienne Route 74), Nilestown, Belmont	280
	198.824	199.787	199	Route 32 du comté Middlesex (Dorchester Road), Dorchester	275
	202.401	203.434	203	Route 73 du comté Middlesex (Elgin Road, ancienne Route 73), Aylmer	268
	208.462	209.012	208	Route 30 du comté Middlesex (Putnam Road), Putnam, Avon	274
South-West Oxford	215.928	216.954	216	Route 10 du comté Oxford (Culloden Road)	289
	218.556	219.505	218	R-19 sud, Route 19 du Comté Oxford (Plank Line), Tilsonburg	290
	222.262	223.207	222	Route 6 du comté Oxford, Stratford, Embro	315
South-West Oxford Woodstock	229.890	230.939	230	Route 12 du comté Oxford (Sweaburg Road), Sweaburg	319
Woodstock	231.977	233.000	232	Route 59 du comté Oxford, Delhi	299
Norwich	235.046	–	235	A-403 est (Direction est seulement) – Brantford, Hamilton, Niagara Falls	304
	236.422	237.286	236	Route 15 du comté Oxford (Towerline Road), Woodstock	311
	237.939	238.976	238AB	Route 2 du comté Oxford, Woodstock, Paris	300
Blandford-Blenheim	249.851	250.612	250	Route 29 du comté Oxford (Drumbo Road), Innerkip	303
North Dumfries	267.903	268.127	268AB	Route régionale 97 de Waterloo (Cedar Creek Road, ancienne Route 97, signalisée 268A et 268B sur la 401 Est)	335
Kitchener Cambridge	274.983	275.815	275	Route régionale 28 de Waterloo (Homer Watson Boulevard / Fountain Street)	295
	277.839(A) 278.245(B)	279.186	278AB	R-8 nord – Kitchener-Waterloo centre, Stratford (sortie 278B en direction Est, 278 en direction Ouest) Route régionale 97 de Waterloo sud, Cambridge (sortie 278A en direction Est seulement)	307
Cambridge	282.224	283.207	282	Vers R-24 sud – Brantford, Cambridge centre Hespeler Road (route régionale 24 de Waterloo)	300
	283.791	–	284	Route régionale 36 de Waterloo (Franklin Boulevard, direction est seulement)	321
	285.774	286.971	286	Route régionale 33 de Waterloo (Townline Road)	315
Puslinch	294.936	296.024	295	R-6 nord – Guelph	310
	299.936	300.412	299	R-6 sud – Hamilton Brock Road (route 46 du Wellington County), Guelph, Hamilton	329
Milton	311.482	312.103	312	Route régionale 1 de Halton (Guelph Line), Burlington, Campbellville	293
	319.669	320.541	320	Route régionale 25 de Halton (ancienne route 25), Milton centre, Acton	208
	323.421	324.313	324	Route régionale 4 de Halton (James Snow Parkway)	197
Milton Halton Hills	327.650	328.607	328	Route régionale 3 de Halton (Trafalgar Road), Oakville, Halton Hills, Georgetown	197
Milton	329.841(A) 330.755(B)	331.730	330AB	A-407 – Oakville, Hamilton, Richmond Hill (vers autoroute 407 ouest seulement depuis la 401 ouest)	224
Mississauga	332.498	333.286	333	Route régionale 19 de Peel, Winston Churchill Boulevard	215
	336.030	337.112	336	Route régionale 1 de Peel (Mississauga Road, Erin Mills Parkway)	197
	339.573	340.442	340	Mavis Road	195
	341.313	–	–	Début des voies express et collectrices (Direction Est)	191
	341.683	343.527	342	Hurontario Street (ancienne route 10), Mississauga Centre-Ville	202
	343.419	345.676 345.870	344	A-403 Ouest (vers QEW – Mississauga centre-ville, Hamilton (accès depuis la 401 ouest seulement) A-410 Nord – Brampton, Orangeville	180
	344.172	346.925 349.920	346	Route régionale 4 de Peel, (Dixie Road; accès à la 410 depuis la 401 ouest)	162
	348.217 348.217	–	–	Accès entre les voies express et collectrices en direction Est	161
Mississauga Toronto	350.274 350.952	–	348	A-427, vers QEW, Gardiner Expwy. – Aéroport Pearson de Toronto, Etobicoke, TORONTO CENTRE-VILLE (direction Est) Renforth Drive (Direction est seulement)	155
TORONTO	351.130	–	350	Eglinton Avenue (Direction Est seulement)	153
	–	352.196	351	Carlingview Drive (Direction ouest seulement)	150
	–	352.963	352	A-427 sud, vers QEW/Gardiner Expwy. – Etobicoke, Hamilton (Direction ouest seulement, aucun accès à la 427 Nord)	151
	353.731	354.476	354	Dixon Road, Martin Grove Road	169
	355.365	–	–	Accès aux voies collectrices en direction Est	156
	–	356.790 357.261	355	A-409 ouest, vers A-427 nord – Aéroport Pearson de Toronto (Direction ouest seulement) Belfield Road (direction ouest)	163
	356.058	356.677 357.213	356	Islington Avenue, quartier Richview	152
	357.418	358.279	357	Weston Road	131
	358.553 358.571	359.822	359	A-400 Nord – Barrie Black Creek Drive Sud, Toronto	129
	360.363 360.363	361.370 361.370	–	Accès complet entre les voies express et collectrices dans les deux directions (Basketweave)	139
	362.007	362.876	362	Keele Street, York, Downsview	173
	363.965	–	364	Dufferin Street, Yorkdale Road (Direction est seulement), quartier Yorkdale	196
	364.649	366.141 366.259	365	Allen Road, Yorkdale Road – York, quartier Lawrence Heights, quartier Bathurst Manor Aéroport local/exécutif de Toronto (YZD) (en)	185
	365.251	–	–	Accès aux voies collectrices (direction Est)	185
	–	366.527	366	Bathurst Street (Direction ouest seulement), quartier Wilson Heights, quartier Nortown	191
	367.370	368.024	367	Avenue Road (Ancienne route 11A), quartier Bedford Park	180
	368.435	368.802	–	Accès aux voies express en direction Est, et aux voies collectrices en direction Ouest	171
	369.071	370.218	369	Yonge Street (Ancienne Route 11), North York, quartier North Toronto	173
	371.056	371.893	371	Bayview Avenue	177
	371.980	372.431	–	Accès aux voies collectrices en direction Est et aux voies express en direction Ouest	169
	372.856	373.954	373	Leslie Street	147
	374.729 374.813	376.071 376.275	375	A-404 nord – Richmond Hill, Newmarket Don Valley Parkway sud – TORONTO CENTRE-VILLE	171
	375.062	375.552	–	Accès aux voies express en direction Est et aux voies collectrices en direction Ouest	174
	376.522	377.319	376	Victoria Park Avenue, quartier Parkwoods	175
	378.153	378.273	378	Warden Avenue, quartier L'Amoreaux, quartier Wexford-Maryvale	182
	378.498	378.875	–	Accès aux voies collectrices en direction Est et aux voies express en direction Ouest	186
	379.173	380.080	379	Kennedy Road, Scarborough (quartier Dorset Park), Agincourt	177
	380.566	381.317	–	Accès aux voies express en direction Est et aux voies collectrices en direction Ouest	176
	380.877	–	380	Brimley Road sud (Direction est seulement), Scarborough	174
	381.651	382.456	381	McCowan Road, Scarborough Centre-Ville, Scarborough Town Centre	165
	382.424	383.065	–	Accès aux voies collectrices en direction Est aux voies express en direction Ouest	161
	383.345	384.189	383	Markham Road (Ancienne Route 48), Markham, Scarborough	166
	384.876	385.573	–	Accès aux voies collectrices en direction Est et aux voies express en direction Ouest	161
	385.026	385.859	385	Neilson Road, quartier Malvern	163
	386.513	387.445	387	Morningside Avenue, quartier Highland Creek	146
	386.718	387.538	–	Accès aux voies express en direction Est et aux voies collectrices en direction Ouest	138
	388.854	389.238	–	Accès aux voies collectrices en direction Est et aux voies express en direction Ouest	128
	389.057	389.882	389	Meadowvale Road, quartier Port Union, Zoo de Toronto	125
	390.278	–	390	Route régionale 2 de Toronto (ancienne R-2), Kingston Road, Port Union Road (Direction Est seulement)	127
	–	391.877	392	Route régionale 2 de Toronto (ancienne R-2), Kingston Road, Toronto Sheppard Avenue (ancienne route 2A), quartier Rouge Port Union Road, quartier Port Union (Direction ouest seulement)	112
	391.911	392.235	–	Accès aux voies express en direction Est et aux voies collectrices (sortie 392) en direction Ouest	106
	–	393.236	–	Accès aux voies express en direction Ouest seulement	99
Pickering	394.031	395.300	394	Route régionale 38 de Durham (Whites Road)	108
	394.919	395.767	–	Accès aux voies collectrices dans les deux directions	98
	–	397.711	397	Route régionale 29 de Durham (Liverpool Road), Pickering centre (Direction ouest seulement)	90
	398.117	399.480	399	Route régionale 1 de Durham (Brock Road)	92
	–	399.089	–	Début des voies express et collectrices en direction Ouest	90
Ajax	401.265	402.176	401	Route régionale 31 de Durham (Westney Road; a remplacé la sortie 400 en 1988)	93
	403.286	404.520	404	Route régionale 41 de Durham (Salem Road), Ajax centre (a remplacé la sortie 403 en 2004)	98
	~406.9		406	Route régionale 23 de Durham, Lake Ridge Road	86
Whitby	~407.7		408	A-412 Nord (connecteur Ouest), vers A-407 – Greenwood, Markham	83
	410.439	410.822	410	Brock Street, Whitby centre (Ancienne route 12)	85
	412.443	413.483	412	Route régionale 26 de Durham (Thickson Road)	94
Oshawa	414.870	415.921	415	Route régionale 53 de Durham (Stevenson Road; a remplacé en 2009 la sortie 416 avec Park Road)	111
	416.893	–	417	Route régionale 2 de Durham (Simcoe Street) Route régionale 22 de Durham (Direction est seulement)	97
	417.538	417.899	418	Route régionale 16 de Durham, Route régionale 2 de Durham (Ritson Road), Oshawa Centre-Ville	103
	418.922	419.797	419	Route régionale 22 de Durham, route régionale 33 de Durham. (Bloor Street, Harmony Road)	85
Clarington	424.612	425.311	425	Route régionale 34 de Durham (Courtice Road), Courtice	101
	~426.5		426	A-418 nord (Connecteur de Durham Est), vers A-407 – Markham, banlieues Nord	108
	427.697	–	428	Holt Road (Direction est seulement), Centrale nucléaire de Darlington	115
	430.857	431.662	431	Route régionale 57 de Durham (Waverley Road), Bowmanville	87
	432.225	432.603	432	Route régionale 14 de Durham (Liberty Street), Bowmanville, Port Darlington	85
	435.077	435.027	435	Bennett Road	111
	435.822	436.841	436	R-35 nord, R-115 nord – Orono, Peterborough	99
	439.846	440.149	440	Route régionale 17 de Durham (Mill Street), Newcastle	91
	447.464	448.374	448	Route régionale 18 de Durham (Newtonville Road), Newtonville	142
Port Hope	455.975	456.883	456	Wesleyville Road	125
	460.881	461.886	461	Route 2 du comté Northumberland (Toronto Road), Welcome, Port Hope centre	137
	464.635	465.269	464	Route 28 du comté Northumberland (Ontario Street, ancienne route 28), Bewdley, Peterborough	106
Cobourg	472.091	473.032	472	Route 18 du comté Northumberland (Burnham Street), Gores Landing	106
	474.597	474.632	474	Route 45 du comté Northumberland (Ancienne route 45), Baltimore (ON), Norwood, Cobourg centre	105
Alnwick/Haldimand	486.544	487.610	487	Route 23 du comté Northumberland (Lyle Street), Grafton, Centreton	166
Cramahe	497.011	497.775	497	Route 25 du comté Northumberland (Percy Street / Big Apple Drive), Colborne, Castleton	167
Brighton	509.832	510.097	509	Route 30 du comté Northumberland (ancienne route 30), Campbellford, Brighton	199
Quinte West	521.886	522.609	522	Route 40 du comté Hastings (Wooler Road), Trenton	112
	524.899	525.296	525	Route 33 du comté Hastings (ancienne route 33), Frankford, Trenton	84
	526.393	526.998	526	Route 4 du comté Hastings (Glen Miller Road), Trenton centre, BFC Trenton	86
Quinte West Belleville	537.911	538.517	538	Route 1 du comté Hastings (Wallbridge-Loyalist Road), Stirling	105
Belleville	542.317(A) 542.682(B)	542.596(A) 543.005(B)	543AB	R-62 (vers route 14 du comté Hastings), Marmora, Madoc, Belleville centre	98
	543.390	543.708	544	R-37, Tweed	95
Tyendinaga	555.492	555.837	556	Route 7 du comté Hastings (Shannonville Road), Shannonville, réserve amérindienne de Tyendinaga	110
	566.040	566.612	566	R-49 sud (Marysville Road), Picton, Sandbanks Route 15 du comté Hastings, Deseronto	104
	570.181	570.695	570	Route 10 du comté Hastings (Deseronto Road), Deseronto	113
Greater Napanee	578.724	578.676	579	Route 41 du comté Lennox et Addington (ancienne route 41), Kaladar, Nepanee centre	101
	581.763	582.132	582	Route 5 du comté Lennox et Addington (Palace Road), Nepanee, Newburgh	91
Loyalist	593.049	593.621	593	Route 4 du comté Lennox et Addington, Camden East Road (ancienne route 133), Millhaven, Camden East	110
	598.599	599.172	599	Route 6 du comté Lennox et Addington (Wilton Road), Yarker, Amherstview, Odessa	125
Kingston	610.754	610.757	611	Gardiners Road (ancienne route 38), Harrowsmith, Sharbot Lake	110
	612.587	613.492	613	Route 9 du comté Frontenac, Sydenham Road	106
	614.801	615.199	615	Sir John A. Macdonald Boulevard, Kingston Centre-Ville	91
	616.286	617.332	617	Route 10 du comté Frontenac (Division Street), Westport	94
	618.038	619.127	619	Route 11 du comté Frontenac (Battersea Road, Montréal Street), Battersea, Kingston Centre-Ville	98
	622.021	623.233	623	R-15 nord – Smiths Falls, Carleton Place Route 15 du Comté Frontenac sud	109
	631.469	632.300	632	Route 16 du comté Frontenac (Joyceville Road), Joyceville	113
Gananoque Leeds and the Thousand Islands	644.671	645.382	645	Route 32 des comtés unis de Leeds et Grenville (ancienne route 32), Crosby	91
	646.485	–	647	Thousand Islands Parkway (Direction est seulement), Rockport	91
Leeds and the Thousand Islands	–	648.361	648	R-2 Route 2 des comtés unis de Leeds et Grenville (sortie est combinée avec 647), Gananoque	88
	658.649	659.276	659	Route 3 des comtés unis de Leeds et Grenville (Reynolds Road), Ivy Lea, Lansdowne	95
	660.638	660.937	661	R-137 sud, Hill Island, Ontario, 1000 Islands, Pont vers les É.-U. État de New York Vers I-81 sud – Alexandria Bay, Watertown, Syracuse	91
Front of Yonge	674.848	675.897	675	Route 5 des comtés unis de Leeds et Grenville (Mallorytown Road), Mallorytown, Rockport	92
Elizabethtown-Kitley	–	684.712	685	Thousand Islands Parkway (Direction Ouest seulement)	91
	686.177	686.913	687	Route 2 des comtés unis de Leeds et Grenville, Brockville (secteur Sud-Ouest)	90
Brockville	695.848	696.617	696	Route 29 des comtés unis de Leeds et Grenville (ancienne route 29 et route 42), Brockville centre, Smiths Falls	99
	697.788	698.496	698	North Augusta Road, Brockville, North Augusta	95
Augusta	704.440	704.542	705	Route 35 des comtés unis de Leeds et Grenville (Maitland Road), Maitland, Merrickville	101
Prescott	715.781	716.580	716	Route 18 des comtés unis de Leeds et Grenville (Edward Street), Prescott	91
Edwardsburgh/Cardinal	718.980	–	721A	A-416 Nord – Ottawa (sortie 721A directe en direction Est seulement)	90
	720.758	721.980	721B 721	R-16, Pont vers USA (vers NY-37), Johnstown, Ogdensburg (NY) (direction Est, numérotée 721B) Vers A-416 nord – Ottawa (direction Ouest, numérotée 721)	90
	729.541	730.283	730	Route 22 des comtés unis de Leeds et Grenville (Shanly Road), Cardinal	91
South Dundas	737.745	738.144	738	Route 1 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Carman Road), Iroquois	80
	749.890	750.631	750	Route 31 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry, (ancienne route 31), Morrisburg, Winchester	81
	758.054	758.260	758	Upper Canada Road, Upper Canada Village	67
South Stormont	769.639	769.957	770	Route 14 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Dickinson Drive), Ingleside	80
	777.524	778.203	778	Route 35 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Moulinette Road), Long Sault	83
	785.949	–	786	Route 33 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Power Dam Drive; direction Est seulement)	66
Cornwall	788.966	789.657	789	R-138 (Brookdale Avenue) – Cornwall centre-ville, Hawkesbury, Alexandria, Ottawa Vers État de New York, Massena (Three Nations Crossing)	60
	791.684	791.965	792	Route 42 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry, McConnell Avenue, Cornwall	60
Cornwall South Glengarry	796.063		796	Route 44 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Boundary Road)	58
South Glengarry	804.258	804.885	804	Route 27 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (Summerstown Road), Summertown	57
	813.353	813.652	814	Route 2 et 34 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (ancienne route 34), Lancaster, Alexandria	50
	824.918	824.920	825	Route 23 des comtés unis de Stormont, Dundas et Glengarry (4th Line Road, Curry Hill Road), Bainsville	48
Continue sur l' Autoroute 20 au Québec
Voies express (sorties 342–399) Voies collectrices (sorties 342–399) En construction

Les aires de service de l'autoroute 401 sont situées aux endroits suivants:

Ces centres de service étaient presque tous fermés et démolis en 2010-2011 pour être remplacés par des nouveaux centres qui s’appellent ONroute (comme jeu de mots sur « en route »), exploités par Host Kilmer, une filiale de HMShost. Les nouveaux centres de service ont des essenceries Canadian Tire et comprennent typiquement un ou deux restaurants, des beignes Tim Hortons et un petit dépanneur.

• (en) Cet article est partiellement ou en totalité issu de l’article de Wikipédia en anglais intitulé « Ontario Highway 401 » (voir la liste des auteurs).